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使用熒光顯微鏡的方法

時間:2022-11-09 10:43:17 來源: 點擊:

  

  使用熒光顯微鏡的方法

  1.用窗簾覆蓋光源,關(guān)閉房間內(nèi)的燈光,清除顯微鏡的防塵罩,確保顯微鏡燈室通風(fēng)良好,無蓋。安裝水銀燈箱,旋轉(zhuǎn)燈箱卡環(huán)上的撥桿,將燈箱與鏡臂連接。2.將水銀燈箱的電源插頭插入英光電源箱后面的插座中,然后將英光電源箱的插頭插入220V外部電源。3.打開電源開關(guān),電流表顯示電源電壓。如果電源電壓波動不大于額定電壓值,±5%,按下啟動開關(guān)以點燃汞燈。如果由于天氣太冷或電壓不穩(wěn)定而一次啟動汞燈,則可以啟動幾次。當(dāng)超高壓汞燈電弧達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)并達(dá)到最大發(fā)光效率時,可以開始工作。

  4.燈泡的調(diào)整:(1)任意一個標(biāo)本放在載貨臺上;(2)旋轉(zhuǎn)鏡臂上的聚光鏡旋鈕,將聚光鏡從光路中移出,旋轉(zhuǎn)濾色片組,轉(zhuǎn)換手輪,將紫光照射(V)或藍(lán)光(B)或綠光(G)激發(fā)濾色片組到光路,并將10X英光物鏡轉(zhuǎn)向光路;(3)調(diào)整手輪,將標(biāo)本圖像清晰對焦;(4)推動垂直照明器右側(cè)的聚光鏡對焦擺動桿,使視場光欄清晰,旋轉(zhuǎn)視場光欄桿將視場光欄縮小,調(diào)整視場光欄中的螺絲使視場光欄居中,然后將視場光欄開到最大;(5)旋轉(zhuǎn)鏡臂上的聚光鏡旋鈕將聚光鏡移入光路,前后調(diào)節(jié)燈箱上的聚光鏡撥桿。使汞燈的電弧在視場中清晰;(6)調(diào)整燈箱上的燈泡水平調(diào)節(jié)螺絲和垂直調(diào)節(jié)螺絲,使汞燈的電弧居中;(7)調(diào)整后視鏡水平調(diào)節(jié)螺絲和垂直調(diào)節(jié)螺絲,使光源的反射圖像與汞燈的電弧分離;(8)旋轉(zhuǎn)聚光鏡旋鈕,將聚光鏡移出光路,然后視場照明平均值。5.看看英光:(1)將熒光染色標(biāo)本放在載物臺上。5.看看英光:(1)將熒光染色標(biāo)本放在載物臺上。(2)10X平場物鏡或40X英光物鏡轉(zhuǎn)向光路,調(diào)養(yǎng)載物臺橫縱移動手輪,將標(biāo)本移入光路。(3)旋轉(zhuǎn)濾光片轉(zhuǎn)換撥輪,將熒光染色標(biāo)本所需的激發(fā)濾光片組轉(zhuǎn)到光路。激發(fā)濾片組編號刻在濾片組轉(zhuǎn)換撥輪上。過濾器選擇是否正確,是熒光顯微鏡獲得正確應(yīng)用的關(guān)鍵。選擇濾光片時,必須遵守斯托克斯定律:激發(fā)濾光片散射波長兩色束分離器散射波長濾光片散射波長。由于激發(fā)過濾器、雙色束分離器和屏障過濾器,根據(jù)其使用和自身的光學(xué)特性停止了嚴(yán)格的組合匹配,在檢查和拍攝時,只需選擇過濾器組。(4)調(diào)整粗調(diào)手輪,當(dāng)看到英光圖像輪廓時,再用微調(diào)手輪調(diào)焦,直至看到清晰的熒光圖像。(5)當(dāng)需要獲得較強(qiáng)的盈光圖像時,可旋轉(zhuǎn)聚光鏡旋鈕將聚光鏡移入光路,可獲得較亮的熒光圖像。(6)需求應(yīng)用40次X或100X檢查英光物鏡時,需要在標(biāo)本和物鏡之間加入甘油,油中不能有影響檢查的小氣泡或雜質(zhì)。使用時可使甘油逐漸浸潤一段時間,然后慢慢上下旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)化器清除氣泡。6.英光顯微鏡攝影-顯微鏡相機(jī)由于英光圖像一般比明場觀看暗得多,因此停止英光顯微鏡攝影需要較長的曝光時間,曝光時應(yīng)注意避免儀器振動。熒光顯微鏡攝影技術(shù)對于記錄英光圖像是非常必要的,因為英光很容易褪色和削弱,要立即拍攝記錄結(jié)果。方法與普通顯微攝影技術(shù)基本相同。


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