普通光學(xué)顯微鏡由三部分構(gòu)成,即①照明系統(tǒng),包括光源和聚光器;②光學(xué)放大系統(tǒng),由物鏡和目鏡組成,是顯微鏡的主體,為了消除色差,目鏡和物鏡都由復(fù)雜的透鏡構(gòu)成;③機械裝置,用于固定材料和觀察方便。一般顯微鏡設(shè)計的最大放大倍數(shù)為1000倍
熒光顯微鏡
細胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一。
激光共聚焦掃描顯微鏡
激光共聚焦掃描顯微鏡,是用激光作掃描光源,逐點、逐行、逐面快速掃描成像,掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡,物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點,也是瞬時成像的物點。由于激光束的波長較短,光束很細,所以共焦激光掃描顯微鏡有較高的分辨力,大約是普通光學(xué)顯微鏡的 3 倍。激光共聚焦掃描顯微鏡既可以用于觀察細胞形態(tài),也可以用于細胞內(nèi)生化成分的定量分析、光密度統(tǒng)計以及細胞形態(tài)的測量。
暗視野顯微鏡
暗視野顯微鏡的聚光鏡中央有擋光片,使照明光線不直接進入物鏡,只允許被標本反射和衍射的光線進入物鏡,因而視野的背景是黑的,物體的邊緣是亮的。利用這種顯微鏡能見到小至4~200納米的微粒子,分辨率可比普通顯微鏡高50倍。
偏光顯微鏡
偏光顯微鏡用于檢測具有雙折射性的物質(zhì),如纖維絲、紡錘體、膠原、染色體等。
微分干涉差顯微鏡
1952 年,Nomarski 在相差顯微鏡原理的基 礎(chǔ)上發(fā)明了微分干涉差顯微鏡(DIC顯微鏡),又稱 Nomarski 相差顯微鏡,其優(yōu)點是能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像。DIC 顯微鏡使細胞的結(jié)構(gòu),特別是一些較大的細胞結(jié)構(gòu),如葉綠體、線粒體等,立體感特別強,適合于顯微操作。目前像基因注入、核移植、轉(zhuǎn)基因等的顯微操作常在這種顯微鏡下進行。
相差顯微鏡
這種顯微鏡最大的特點是可以觀察未經(jīng)染色的標本和活細胞。相差顯微鏡的基本原理是,把透過標本的可見光的光程差變成振幅差,從而提高了各種結(jié)構(gòu)間的對比度,使各種結(jié)構(gòu)變得清晰可見。